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紫外檢測(cè)儀..
  • 發(fā)布日期:2019-07-17      瀏覽次數(shù):1909
    • 儀器簡(jiǎn)介:

      應(yīng)用范圍:

      高性能雙光束紫外檢測(cè)儀,適用于生物化學(xué)、合成化學(xué)、天然產(chǎn)物、藥物開發(fā)、食品化學(xué)、農(nóng)業(yè)化學(xué)、化妝品、聚合物與石化等行業(yè)的科研與制備??蛇M(jìn)行離子交換層析、親和層析 凝膠過濾層析、疏水作用層析等方法,用于 蛋白質(zhì)、酶、核酸、核苷酸、多肽、(含/不含芳香族氨基酸)及其它任何有紫外吸收的生物/非生物樣品的分離分析、流動(dòng)檢測(cè),是生物分子純化的理想選擇。


      主要特點(diǎn):

      我公司生產(chǎn)的高性能雙光束核酸蛋白紫外檢測(cè)儀與市場(chǎng)上單光束核酸蛋白紫外檢測(cè)儀比較:

      一、光源不同、單色性精度達(dá)99。9%

      二、光路不同,穩(wěn)定性時(shí)間小于20 分鐘內(nèi)。

      三、價(jià)格一樣,性價(jià)比高

       

      核酸與蛋白測(cè)試原理

      蛋白質(zhì)分子中含有共軛雙鍵的酪氨酸、色氨酸等芳香族氨基酸。它們具有吸收紫外光的性質(zhì),其吸收高峰在280nm波長(zhǎng)處,且在此波長(zhǎng)內(nèi)吸收峰的光密度值與其濃度成正比關(guān)系,故可作為蛋白質(zhì)定性、定量測(cè)定的依據(jù),正因?yàn)槿绱耍?80nm處的紫外吸收法通常被用于層析系統(tǒng)中蛋白質(zhì)濃度的連續(xù)監(jiān)控。但由于各種蛋白質(zhì)的酪氨酸和色氨酸的含量不同,故要準(zhǔn)確定量,必需要有待測(cè)蛋白質(zhì)的純品作為標(biāo)準(zhǔn)來比較,或且已經(jīng)知道其消光系數(shù)作為參考。另外,不少非蛋白物質(zhì)在280nm波長(zhǎng)下也有—定吸收能力,可能發(fā)生干擾。其中尤以核酸(嘌呤和嘧啶堿)的影響更為嚴(yán)重。在280nm處的吸收比蛋白質(zhì)強(qiáng)10倍(每克),但核酸在254nm處的吸收更強(qiáng),其吸收高峰在254nm附近。核酸254nm處的消光系數(shù)是280nm處的2倍,而蛋白質(zhì)則相反,280nm紫外吸收值大于254nm的吸收值。通常:
      純蛋白質(zhì)的光吸收比值:A280/A254 >> 1.8
      純核酸的光吸收比值: A280/A254 << 0.5
      因此蛋白質(zhì)溶液中同時(shí)存在核酸時(shí)(生物體系大多數(shù)如此),必須同時(shí)測(cè)定OD254nm,與OD280nm。然后根據(jù)兩種波長(zhǎng)的吸收度的比值,通過經(jīng)驗(yàn)公式校正,以消除核酸的影響而推算出蛋白質(zhì)的真實(shí)含量。
      蛋白質(zhì)濃度=1.45×A280-0.74×A254 (mg/ml)
      此經(jīng)驗(yàn)公式是通過一系列已知不同濃度比例的蛋白質(zhì)(酵母烯醇化酶)和核酸(酵母核酸)的混合液所測(cè)定的數(shù)據(jù)來建立的。

       

       

       

       

       

       

       

       

       

       

       

       

       

       

       

       

       

       

       

       

       

       

       

       

       

       

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